Анализ ифа: что значат результаты теста на антитела к коронавирусу

Качество тестов

Качество ИФА тестов разное, я сделал обзор доступных в России тестов.

В случае ПЦРК дополнительно нарушается методика взятия мазка. Мазки берутся не из носоглотки (основные ворота инфекции), а из ротоглотки или из полости носа (носовых ходов), что многократно снижает результативность лабораторного подтверждения диагноза. Плюс исследования методом ПЦР проводятся тест-системами с разной чувствительностью (с порогом от 100 до 10000 копий). Что естественным образом приводит к недостоверности результатов при низкой чувствительности метода.

Официально ПЦР тесты давали 20-30% ложноотрицательных тестов, по факту больше.

Таблица Роспотребнадзора:

ИФА тест коронавируса Covid-19 (SARS-CoV-2) таблица определения состояния пациента по IgM, IgG

Выбор биологической жидкости

Коронавирус переходит в организм через слизистую носоглотки или конъюнктиву глаз. Он размножается, вызывает воспаление. Затем проникает в кровь. На основе этих данных врач рекомендует биологическую жидкость для проверки на covid-19. В таблице указано, что лучше сдавать, мазок или кровь на коронавирус, чтобы получить достоверный результат, исключить ложные реакции.

Вид биологической жидкости	Рекомендации по исследованию
Мокрота	Сдают в острую стадию. Вирус первоначально попадает в мокроту до распространения в кровоток. Мазок берут из полости носа, зева в первые 10 суток патологии. Так как болезнь передается при чихании, разговоре вместе с мокротой, рекомендуется брать ее мазок после завершения болезни для подтверждения выздоровления
Кровь	Кровь нужно сдать в случае, если человек уже переболел. Выявляют антитела, направленные на возбудитель. Они могут сохраняться до 6 месяцев, после этого момента их концентрация постепенно уменьшается. Лучше брать венозную кровь, капиллярная биологическая жидкость может не содержать РНК covid-19

С помощью экспресс-тестов берут капиллярную кровь из пальца, когда наблюдается острая стадия болезни. Но в этот период антиген может содержаться в малых количествах, поэтому анализ будет ложноотрицательным. Достоверные данные на начальных этапах показывает мазок из носоглотки, определенный методом ПЦР. Если прошло 10-14 дней, можно сдавать кровь, результат будет точным.

Анализ на антитела

Антитела — это иммунные клетки, которые формируются в ответ на внедрение возбудителя. Иначе они называются иммуноглобулины G. Для прохождения исследования требуется сдать биологическую жидкость. Так как антитела присутствуют только в системном кровотоке, берут только венозную кровь. Предварительной подготовки к тесту не требуется, так как иммуноглобулины постоянно концентрируются в организме человека первые 2-6 месяцев после болезни. После прохождения теста возможны следующие результаты:

• отрицательный — полное отсутствие иммуноглобулинов G (вирус не проникал в организм или антитела полностью устранились через 6-8 месяцев);

• положительный — указывают не только наличие иммуноглобулинов G, но и их точное количество.

Чем больше уровень антител, тем активнее и сильнее иммунная защита. Если концентрация иммуноглобулинов менее 50, их хватит не более, чем на 2-4 месяца.

У некоторых пациентов с тяжелым прохождением инфекции уровень антител увеличивается свыше 100 единиц. Такая защита наиболее эффективна, может держаться вплоть до 8 месяцев.

Рекомендуется сдавать анализ на антитела через 1 месяц после завершения болезни, иначе их можно не выявить. Через 30-40 суток число этих клеток многократно увеличивается, достигая максимума. По желанию пациента тест можно проводить повторно через 6 месяцев.

ИФА тест коронавирус – 200000 тестов в день в Москве начиная с 15 мая

Что такое антитела и какими они бывают

Антитела — это белки, вырабатываемые иммунной системой в ответ на проникновение возбудителя. Именно по ним определяют стадию развития инфекции. Также по ним  контролируют течение заболевания. Антитела разделяются на классы:

Антитела IgA. Образуются на ранней стадии заболевания в слизистых оболочках в ответ на местное воздействие инфекции. Они не формируют клеточную память, поэтому в формировании устойчивого иммунитета не участвуют. 

Антитела IgM. Иммуноглобулины этого класса первыми появляются в крови в ответ на внедрение чужеродного антигена в организм. Они тоже не формируют длительного иммунитета. Зато по наличию антител IgA и IgM можно определить. что заболевание находится в активной фазе (даже если внешние симптомы отсутствуют). 

Антитела IgG. Отвечают за длительную защиту организма после перенесенных инфекционных заболеваний и обеспечивают основной иммунный ответ. Уровень антител IgG повышается медленнее и достигает стабильного уровня в среднем через 15-20 дней после начала заболевания. 

Чтобы понять, на какой стадии находится инфекционное заболевание, учитывая специфику коронавирусной инфекции, нужно сдавать анализы двух типов: на определение антител IgА (или IgM) и IgG одновременно.

В случае положительного результата по антителам IgG необходимо провести повторный анализ. Сделать его рекомендуется через 14 дней после первого, чтобы определить увеличение или снижение концентрации IgG. В случае, если при повторном анализе уровень антител повысится или снизится, говорить о формировании иммунитета нельзя.

Если у пациента  при первой сдаче анализов не было выявлено антител IgM, а значение IgG равно 10 и больше, а при повторной диагностике значение IgG не увеличилось,  можно говорить о том, что человек переболел как минимум месяц назад и с большой вероятностью  имеет иммунитет к коронавирусу.

Впрочем, положительный результат на антитела к COVID-19 пока не может считаться стопроцентной гарантией неподверженности вирусу. Ученые еще не собрали достаточно данных, чтобы дать окончательный ответ, насколько долго сохраняется иммунитет.

Важный момент: особенностью иммунного ответа к новой коронавирусной инфекции является практически одновременное появление антител как класса IgM, так класса IgA. Однако антитела класса А сохраняются дольше и поэтому в совокупности с IgG имеют большее диагностическое значение.

Что значит ИФА-анализ и как он проводится

Суть этого исследования – обнаружение в сыворотке крови и измерение концентрации антител (иммуноглобулинов, Ig). Эти соединения выделяются организмом в ответ на попадание антигенов – чужеродных белков, принадлежащих возбудителям инфекции.

При проведении анализа методом ИФА в сыворотку крови добавляют реактивы, содержащие «меченые» антигены. Эти компоненты «ищут» антитела–иммуноглобулины, выработанные организмом в ответ на имеющуюся инфекцию, и соединяются с ними. Такая реакция называется антиген-антитело.

То есть это исследование ищет не самих возбудителей, а вещества, образовавшиеся из-за их вторжения. Поскольку белки антигенов, входящие в состав реактивов, метят определённым образом, их соединения с иммуноглобулинами можно обнаружить лабораторным путем. При выявлении в образце сыворотки крови комплексов антиген-антитело ИФА-анализ считается положительным.

Лабораторные исследования

Применяемые реактивы «настроены» на конкретных возбудителей. Это дает возможность устранить ложноположительные тесты, указывающие на несуществующее заражение.

Исследования дают возможность выявить примерный период заражения, а также определить характер и тяжесть болезни. С помощью этого метода также определяют содержание каждого из иммуноглобулинов или их общую (суммарную) концентрацию, которая меняется в зависимости от периода и тяжести заболевания.

В разные периоды болезни выделяется несколько видов антител (иммуноглобулинов, Ig):

• IgM – образуются в острую фазу болезни, т.е. примерно через 2 недели после инфицирования. Затем их уровень постепенно падает.
• IgA – появляются в разгар инфекционного процесса. По мере выздоровления их содержание уменьшается. Если уровень IgA в ходе лечения не снижается, велика вероятность, что болезнь перешла в хроническую форму.
• IgG – выявляются на этапе выздоровления. Они могут долго обнаруживаться в организме даже после полного излечения. В некоторых случаях такие иммуноглобулины остаются в организме пожизненно. В такой ситуации ИФА крови показывает не имеющуюся, а когда-то перенесенную инфекцию.

Обнаружение IgM и IgG указывает на обострение хронического инфекционного процесса, поэтому считается неблагоприятным признаком.

Как это работает?

Сначала вирусную ДНК выделяют из материала, представленного в лабораторию, денатурируют: на этом этапе двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96 °C, чтобы цепи ДНК разошлись. Затем добавляют так называемые праймеры — начальные звенья цепочки, которые необходимы для старта синтеза новой копии, и так называемую полимеразу — тот самый фермент, который и будет заниматься репликацией ДНК.

Схема: как ДНК-полимераза копирует каждую из цепочек ДНК по отдельности. РНК-праймер изображен белым прямоугольником в начале каждой из двух цепей

Как правило, для лабораторной ПЦР используются ДНК-полимеразы из термофильных бактерий, поскольку в течение реакции смесь многократно охлаждают и нагревают. На следующем этапе в смесь из ДНК, полимеразы и праймеров добавляются нуклеотиды — то есть строительный материал для воспроизводства, после чего емкость с нею нагревается до 37°C, и процесс запускается.

На последующей стадии элонгации полимераза начинает синтез на каждой из двух цепочек разделенной ДНК недостающей пары. Происходит это по принципу комплементарности: фермент присоединяет напротив каждого нуклеотида, из которых состоят ДНК, противоположный. По завершении реакции цикл неоднократно повторяется (см. видео ниже).

Общая схема полимераной цепной реакции. Цифрами обозначены ее этапы. 

В случае с вирусами, содержащими не «двойную» ДНК молекулу, а «одинарную» РНК (а это коронавирусы, или, например, ВИЧ), ученым приходится сначала провести обратную транскрипцию РНК с помощью фермента обратной транскриптазы, а уже потом производить амплификацию по той схеме, что была указана выше. Именно так, собственно, поступает и сам вирус, попадая в клетку, перед тем как встроить свою ДНК в человеческую и приступить к синтезу собственных белков, из которых состоит его «тело» (то есть не генетического материала, а самих вирусных частиц, при ПЦР же, наоборот, копируется генетический материал, а не новые частицы вируса).

Ингибиторы обратной транскриптазы — одни из самых распространенных видов лекарств от ВИЧ-инфекции. К ним относятся, например, зидовудин и ламивудин — самые первые препараты АРВТ, разработанные еще в 80-х.

Производится ПЦР на специальных приборах, амплификаторах, или так называемых термоциклерах (Thermal cycler).

Стоимость

В аптеках реализуются системы для определения уровня сахара, мочевой кислоты и даже наркотических веществ. Но приобрести тест для домашней диагностики возбудителей коронавирусной инфекции или антител не получится. Они есть только в лабораториях государственных или частных медицинских центрах. Стоимость тест-систем существенно разнится в зависимости от производителя, комплектации, используемого метода обнаружения патогенов.

Цены тест-систем на коронавирус включают стоимость услуг медицинских работников, включая их перемещение по городу

При выборе учреждения для диагностики коронавируса следует заранее уточнить цену предоставляемых услуг. Ведь она может складываться из стоимости забора биологических образцов, расшифровки полученных результатов.

Вот приблизительные данные, сколько стоит обследование на коронавирус:

• «Гемотест» — 1800 рублей;
• «Хеликс» — 900 рублей;
• «Медси» — 2 тыс. рублей.

Сейчас многие медицинские учреждения, преимущественно частные, предоставляют услуги забора биоматериала в домашних условиях. Это очень удобно, так как не приходится рисковать, добираясь до клиники, контактируя с большим количеством людей. Но подобное диагностирование обойдется значительно дороже. В его цену уже заложена стоимость поездок по городу и услуги медицинского персонала.

Полимеразная цепная реакция

С помощью ПЦР с 95% точностью удается выставить диагноз коронавирусная инфекция, обнаружив РНК ее возбудителей в мазке из ротоглотки, мокроте, выделяемой при откашливании. Этим методом можно обследовать и венозную кровь, но выполняется это достаточно редко. Дело в том, что репликация коронавирусов происходит в слизистых оболочках дыхательных путей.

В кровь они проникают только при тяжелом течении болезни. Исследование же мазка позволяет диагностировать инфекцию на самом раннем этапе ее развития.

Метод ПРЦ основан на обнаружении фрагментов РНК коронавирусов после их многократного клонирования. Затем генетический материал отделяют в процессе электрофореза, вносят в лунки лабораторной посуды, добавляют реагенты и идентифицируют по специфическому окрашиванию. Подобное тестирование проводится во всех лабораториях страны с аккредитаций Роспотребнадзора:

• Гемотест;

• Инвитро;
• VMEDIC и многих других.

Основное преимущество полимеразной цепной реакции — возможность диагностирования коронавируса у людей, которые являются бессимптомными носителями. Это позволяет им своевременно самоизолироваться, не успев заразить домочадцев, коллег, попутчиков в общественном транспорте.

Результаты тестирования

У ПЦР-диагностики несколько целей, но основной становится обнаружение в биоматериале коронавирусов. Расшифровку результата проводят сотрудники лабораторий, аккредитованных Минздравом, у которых есть высшее медицинское образование. Он может быть только положительным или отрицательным. Последний указывает на отсутствие генетического материала инфекционных возбудителей в мазке. А положительные данные становятся причиной самоизоляции и проведения лечения (при необходимости в нем).

Анализ методом полимеразной цепной реакции биоматериала больного проводится трижды. Человек считается выздоровевшим, если по результатам третьего обследования у него не обнаружено коронавирусов. Это означает, что инфекционно-воспалительный процесс купирован и можно закрыть больничный. Более частое выполнение анализа требуется при получении сомнительного результата.

То есть, данные ПРЦ отрицательные, но у человека есть комплекс симптомов, характерных для коронавируса. Почему могут быть получены такие результаты:

• неправильная подготовка к тестированию;
• неправильный сбор, хранение и транспортировка образца;
• нарушение методики проведения ПЦР.

Ложноотрицательный результат также может быть получен. Но такие ситуации отмечаются исключительно редко и обычно из-за наличия в организме обследуемого какой-либо скрыто протекающей инфекции.

Платно или бесплатно?

Бесплатный анализ показан при выраженной симптоматике тяжелой коронавирусной инфекции. В том числе, при признаках развивающейся пневмонии. Но касается это только жителей небольших населенных пунктов. В столице, крупных областных и региональных центрах несколько месяцев действует программа бесплатного тестирования всех желающих провериться методом ПРЦ.

Но при условии отсутствия признаков инфекции и наличии документов, удостоверяющих личность. Бесплатное обследование проводится и людям из группы риска:

• имевшим контакты в течение 2 последних недель с людьми, у которых впоследствии был подтвержден коронавирус;
• имеющим постоянный контакт с зараженными во время ухода за ними;

• гражданам старше 65 лет, у которых есть все характерные признаки инфекционного поражения дыхательных путей;

• медицинским работникам с высоким риском заражения при исполнении своих служебных обязанностей;
• медицинским работникам с симптомами острого респираторного вирусного заболевания.

Массовое бесплатное обследование проводится в местах постоянного пребывания при выявлении у одного из находящихся в нем граждан коронавируса. Так проверяются специальные учебно-воспитательные учреждения закрытого типа, кадетские корпуса, дома-интернаты. Ранее сдать бесплатно анализ могли люди, прибывшие из-за границы, теперь им приходится оплачивать услуги лаборатории.

Расшифровка результатов

Интерпретацией полученных данных занимается врач, который дал направление на диагностику. Если пациент самостоятельно решил пройти обследование, то с бланком следует обратиться к специалисту.

ПЦР

В бланке с результатами обычно значится одно слово – «положительный» либо «отрицательный». «Положительный» ответ говорит о наличии в организме человека возбудителя коронавирусной инфекции. Данные такого анализа обязательно передаются в лабораторный центр Министерства здравоохранения. Пациенту необходимо соблюдать условия самоизоляции и сообщить своему семейному врачу о положительном результате.

«Отрицательный» ответ говорит об отсутствии возбудителя КВИ в биоматериале, который был сдан в качестве образца для исследования. Такой итог не является диагнозом, а значит, если есть какие-либо признаки ОРВИ или острого респираторного синдрома, необходимо обратиться к врачу.

Тест на антитела

Ответы могут быть следующими:

• «первично положительный»;
• «положительный»;
• «отрицательный».

При «первично положительном» результате анализа на антитела IgA/IgМ/IgG специалисты советуют не впадать в панику, а пройти ПЦР-исследование на КОВИД-19. «Положительный» ответ говорит о том, что человек болен сейчас или был инфицирован в прошлом, что зависит от показателей той или иной группы иммуноглобулинов. Наличие иммуноглобулина М говорит об остром инфекционном процессе, то есть пациент болеет в данный момент времени. Если найдены иммуноглобулины M и G, это является свидетельством того, что особа уже переболела либо находится на этапе выздоровления.

IgM: < 1IgG: < 10	IgM: от 1 до 2IgG: < 10	IgM: ≥ 2IgG: < 10	IgM: ≥ 2IgG: ≥ 10	IgM: < 2IgG: ≥ 10
не сталкивался с вирусом	сомнительный результат	в стадии заболевания	сомнительный результат	переболел

Интерпретация результатов исследования

К примеру, если по результатам теста выявлены показатели IgM: 1.42 и IgG: 154.15 — это означает, что человек переболел коронавирусом и у него выработался хороший иммунитет. Показатели IgM: 5.12 и IgG: 9.51 свидетельствуют о процессе заболевания и необходимости соблюдать самоизоляцию.

Следует помнить, что наличие антител в организме человека не говорит именно о том, что он болеет COVID-19. Это всего лишь косвенный признак, который необходимо подтвердить ПЦР-исследованием, поскольку не только коронавирус может вызывать иммунную реакцию организма, но и ряд других не менее опасных инфекций.

Экспресс-метод

На тесте есть контрольная линия (С), она в любом случае должна в ходе исследования закрашиваться. Если этого не происходит, значит, тест недействителен, возможно, бракован

Такие результаты во внимание не берутся. Отрицательный тест будет в том случае, если закрашенной окажется только контрольная линия, а остальные (IgM, IgG) останутся в своем первоначальном виде

Положительным считается ответ:

• закрашена линия IgM + контрольная;
• закрашена линия IgG + контрольная;
• обе линии закрашены + контрольная.

Важно! Интенсивность окрашивания линий может быть различной.

Расшифровка данных по основным показателям

Анализ крови при коронавирусе помогает не только в диагностике, но и в определении степени тяжести заболевания, прогнозировании исхода, коррекции терапии. Кроме антител, имеет значение сила воспаления в легких, основными характеристиками которого считаются лейкоциты и СОЭ.

Лейкоциты оказываются пониженными почти у 80% случаев коронавируса. Это значит, что иммунитет значительно угнетен, можно ждать развития серьезных осложнений. В самом тяжелом варианте воспаление в легких становится генерализованным, что вызывает приток в эту зону иммунных клеток и провоцирует цитокиновый шторм –неблагоприятный прогностический признак.

Гипериммунная реакция вызывает отек легких, острую дыхательную недостаточность, летальный исход. Отмечен параллельный рост ферритина в крови, что взаимосвязано со степенью повреждения легочной ткани.

Какие анализы показывают антитела

Сегодня действуют два варианта тестирования на иммуноглобулины к коронавирусу: лабораторный ИФА и экспресс-тест, который можно провести самостоятельно. ИФА является более точным методом оценки. Анализ может показать наличие антител и их количество.

Экспресс-тест отличается меньшей информативностью, поскольку дает только качественную оценку антител. Экспрессное тестирование на антитела к штамму коронавируса работает подобно стандартному тесту на беременность. На картридж нужно капнуть капельку крови и через 5-10 мин оценить результат.

Экспресс-тест-система (варианты результата)

Сегодня используется около 40 тест-систем, производимых в РФ, Китае, Голландии и Германии.

Как делают ИФА

ИФА крови (иммуноферментный анализ) – метод качественно-количественной диагностики, применяемый для выявления антител к коронавирусу. Исследование выполняется поэтапно:

• Исследовательский экземпляр вируса размещают на лабораторной поверхности и дополняют образцом крови пациента. Ig дифференцируют вирус по системе «свой – чужой». Признав антиген чужеродным, они берут его в кольцо. Это будет комплекс антиген-антитело.
• К сформированному комплексу присоединяют специальные ферменты, и с помощью колориметра оценивают цветовые изменения. Степень окраски показывает концентрацию вирусных частиц.

Результаты исследования оцениваются:

• по качеству – присутствие/отсутствие коронавируса;
• по количеству – концентрация (титры) иммуноглобулинов;
• по соотношению иммуноглобулинов – стадия КОВИД-19.

Иммуноферментный анализ выполняется с целью выявления бессимптомных носителей инфекции и людей, переболевших КОВИД-19. В первом случае рассматриваются показатели IgM, во втором – IgG.

Чем отличаются ПЦР-тест и анализы на антитела?

Тесты на антитела являются вспомогательным исследованием, дающим представление о стадии инфицирования и наличия иммуноглобулинов в организме человека.

ПЦР-диагностика используется Минздравом, как основной метод анализа на коронавирусную инфекцию, позволяющую выявить ее с первых дней заражения.

Рассмотрим, какие виды тестов целесообразно использовать в разных стадиях заболевания:

Период заражения	Предположительный срок с момента заражения, в днях	Метод тестирования
Инкубационный	1-14	ПЦР
Ранний срок	5-10	ПЦР, антитела IgM
Активная фаза	8-14	ПЦР, антитела IgM и IgG
Выздоровление	14-24	ПЦР, антитела IgG
Полное выздоровление	более 24	антитела IgG

Подготовка к диагностике

Для получения достоверных результатов важно соблюдать правила подготовки к забору биоматериала. Перед мазком из зева и носа нельзя кушать, чистить зубы, курить и жевать резинку в течение 2 часов, на протяжении последних 30 минут не пить воду

Также на протяжении последних 2 часов рекомендуют не использовать капли/спреи в нос, горло. Если наблюдается большое количество вязкого секрета, то перед проведением мазка нужно высморкаться.

Забор венозной крови проводят утром натощак либо не ранее, чем через 6-8 часов с момента последнего приема пищи. Пить воду на протяжении этого времени можно. Если пациент принимал в течение 2 последних недель препараты, влияющие на состояние иммунной системы (Амиксин, Тилорон-С3), необходимо сообщить об этом лаборанту. Тот сделает соответствующие пометки на бланке анализа.

Как работает

Максимальная аналитическая чувствительность в диагностике коронавирусной инфекции характерна для полимеразной цепной реакции (ПРЦ). Проведение исследование позволяет обнаружить в биологических образцах пациента даже микроскопические фрагменты РНК возбудителей. Благодаря лабораторному тестированию одновременно выявляется принадлежность вируса к определенному генотипу. А для обнаружения уже сформировавшегося иммунитета выполняется тест по методу ИФА.

Полимеразная цепная реакция

Это наиболее информативный метод диагностики коронавирусной инфекции. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют РНК возбудителей патологии, находящихся в пробах биологического материала, в том числе крови. Даже при наличии одного фрагмента обнаруживается его присутствие, определяется видовая принадлежность вирусов. Своевременное проведение анализа ПЦР позволяет избежать развития инфекционных осложнений, самым грозным из которых является пневмония.

Для чего необходимо подобное лабораторное тестирование:

• подтверждения первичного диагноза;
• установления вирусной нагрузки;
• выявления тяжести течения заболевания и возможной смешанной инфекции;
• определения лечебной тактики с учетом генотипов вируса;
• оценки динамики проводимой терапии противовирусными средствами или иммуномодуляторами.

В биообразцы добавляют реагенты, а затем держат в термостате при определенной температуре. Это позволяет создать оптимальные условия для клонирования фрагментов вирусной РНК. Ее нити разъединяются, что способствует присоединению специфического праймера, запускающего клонирование. Это своеобразная затравка для синтеза цепи в процессе репликации, входящая в набор реагентов современных тест-систем.

Наиболее информативны тест-системы на коронавирус, принцип действия которых основан на ПРЦ

Полезная информация! По оценке Росздравнадзора зарегистрированные в РФ тест-системы для диагностики коронавирусной инфекции имеют 95% точность. Возможность ошибки вероятностью в 5% приходится на случаи неправильного сбора или обработки биообразца для анализа и нарушений при его перемещении и хранении.

Иммуноферментный анализ

Примерно через 6-7 недель в системном кровотоке зараженного человека начинают обнаруживаться антитела. Это иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой для уничтожения вирусов. Выявляются антитела проведением иммуноферментного анализа, менее точного, чем полимеразная цепная реакция. При наличии признаков заражения на фоне его отрицательного результата назначается ПРЦ.

Обнаружить в кровеносном русле IgM или IgG возможно в лабораторных условиях за относительно непродолжительное время. В основе иммуноферментного анализа лежит реакция антиген-антитело. В качестве биологического образца обычно используется сыворотка венозной крови. Ее помещают в пластиковые планшеты с несколькими лунками. В каждой из них находится определенный очищенный антиген к антителам IgG и IgM.

После внесения биообразцов в лунках происходит формирование иммунных комплексов, но работает это только при наличии в крови иммуноглобулинов на коронавирусы. На их образование указывают ферментные реакции красящих веществ с высокомолекулярными комплексами. Теперь можно с помощью определенной инструментальной методики оценить оптическую плотность, сделать вывод о результатах тестирования.

Референсные значения

Результаты количественного исследования указывают всегда в конкретных единицах, например, МЕ/мл. Это необходимо для оценки сформировавшегося у человека иммунитета или степени тяжести инфекционно-воспалительного процесса. Референсными значениями называются усредненные показатели числа антител, рассчитанные после масштабного тестирования здоровых людей для выявления степени сформировавшегося коллективного иммунитета.

Чтобы определить количество иммуноглобулинов к коронавирусам, которые находятся в крови у конкретного пациента, вычисляют разницу между цифровыми значениями IgG и референсными показателем антител.

Общепринятым референсным значением для коронавирусной инфекции являются параметры IgM — 2 и IgG — 10. Последние надежно защищают человека от повторного внедрения коронавирусов. Они «запомнили» этих инфекционных возбудителей, поэтому сразу обнаруживают их и ликвидируют, препятствуя репликации и распространению.

По цифровым же значениям IgM медики судят о степени тяжести инфекционного процесса. Так что задачи проведения иммуноферментного анализа определяют вид выявляемых антител.

Антитела есть – иммунитета нет?

Обработанные данные, собранные на основе анализа огромного количества проведенных тестов, показали неожиданный результат, который пока не получил однозначного ответа. Дело в том, что выработка специфического приобретенного иммунитета – это стандартный привычный всем результат, и повторного инфицирования хотя бы в ближайшее время по статистике не ожидается. Однако с новым коронавирусом по-другому.

Ранее исследования показали, что у большинства переболевших COVID-19 антитела образуются в достаточном количестве, но приблизительно у 6 % пациентов – иммунитет не вырабатывается. А у некоторых переболевших после выздоровления антитела были обнаружены в малых количествах, явно неспособных обеспечить достойный отпор при повторном инфицировании.

При этом последние работы ученых выявили крайне интересные особенности, что даже после исчезновения антител из крови, иммунитет к коронавирусной инфекции остается. Это происходит благодаря памяти В- и Т-лимфоцитов – иммунных клеток, отвечающих за долгосрочный иммунитет.

Ученые полагают, что эти клетки могут стать основой создания вакцин от коронавируса, а впоследствии формирования коллективного иммунитета. Т-клетки способны распознавать патогены, с которыми организм уже сталкивался на протяжении жизни и нейтрализовать их, предупреждая развитие заболевания.

Такие клетки были обнаружены в образцах крови, взятых несколько лет назад, и ученые обнаружили, что они могут бороться с новым типом коронавируса. Люди, в то время сдававшие кровь, болеть COVID-19 не могли, но подвергались заражению другими коронавирусами, однако протекали патологии лишь при наличии простудной симптоматики.

Наличие антител в крови – не повод отказываться от защитных средств. Выявив Т-клетки, реагировавшие на новый возбудитель, в старых образцах крови, ученые сделали вывод, что иммунитет, сформированный при инфицировании другими коронавирусами, способен сохраняться длительное время и защитить человека от заражения активно распространяющимся сейчас микроорганизмом.

Именно частой подверженностью различным респираторным заболеваниям эксперты объясняют, что дети обычно легко болеют COVID-19. Вероятно, подобный механизм срабатывает и у взрослых людей, сохранивших иммунитет после ранее перенесенных простуд.

Где сдать

Бесплатно тест на коронавирус сдается в государственных лабораториях, подчиненных Минздраву или Роспотребнадзору. Сейчас таких тестов достаточно во всех городах, поэтому при подозрении на заболевание, а также людям из группы риска врачи дают направление.

На платной основе сначала стали делать анализы только в Москве и Санкт-Петербурге. Первыми получили разрешение Роспотребнадзора на это лаборатории «Гемотест» и «Хеликс». Можно даже пригласить медиков домой. Такой анализ делается Центром Молекулярной диагностики Роспотребнадзора. Сам тест стоит от 600 до 1500 рублей, не считая платы за выезд на дом и забор материала.

Сейчас тестирование на COVID-19 проводят несколько лабораторий в разных городах России. Где можно сдать такой анализ, лучше посмотреть на сайте Роспотребнадзора. А потом позвонить и записаться, так как все расписано на несколько дней и даже недель. В середине апреля тестирование доступно в таких центрах:

• LabQuest делает анализ за 3395 рублей. Используется один из самых точных тестов, результат готов уже через сутки. Для записи позвонить по телефону 8 (800) 700-09-99.
• «Гемотест» – анализ стоит 1900 рублей, телефон для записи +7 (800) 550-13-13. Результат готов через 2 дня.
• «Хеликс» проводит самый дешевый анализ, всего 600 рублей. Забронировать можно по телефону +7 (800) 700-03-03. Результаты готовы через сутки.
• «Медси» – стоит 2000 рублей, делается анализ 3-4 дня. Записаться по телефону +7 (495) 023-60-84.

Анализ на наличие вируса SARS-CoV-2 – это способ обнаружить инфекцию на начальном этапе и предотвратить осложнения. Его обязательно нужно сделать тем, кто контактирует с больными людьми, ездил недавно за границу или ощущает симптомы ОРВИ. Остальным желательно не выходить из дома без необходимости, носить маску и перчатки и применять другие меры профилактики. А если есть подозрение на COVID-19, можно сделать такой анализ платно.

Показания, как выполняется тестирование

Суть тестирования – поиск антител к коронавирусу. В первую неделю их мало, поэтому достоверный результат может быть получен уже в разгар болезни, при наличии специфических симптомов.

Еще одно показание для исследования на COVID-19 – определение иммунитета уже у переболевших пациентов. Антитела появляются у всех, даже у бессимптомников, но держатся в крови в этом случае не более 2 месяцев. У некоторых антитела не вырабатываются совсем.

При тестировании на коронавирус используют шведскую модификацию классической ИФА, которая называется ELISA.  В России есть свои наработки, но они используются вместе со шведской и голландской версией теста. Поскольку наличие антител говорит, болеет ли человек или уже переболел коронавирусом, то назначают тестирование, прежде всего:

• пациентам с признаками ОРЗ, ОРВИ, простуды, что объяснимо в период пандемии;
• людям, контактировавшим с больными коронавирусом;
• всем медикам, сотрудникам лабораторий;
• государственным служащим.

Отдельную группу составляют люди, которые хотят знать, переболели ли они Covid-19.

При тестировании на антитела используют метод ИФА на базе ферментов (иммуноферментный анализ) или ИФЛА (иммунохемилюминесцентный анализ) на основе дополнительной люминисцентной обработки антител. Смысл такого экспресс-тестирования зафиксировать количество иммуноглобулинов М и G. Анализ можно провести только в лабораторных условиях, но забор биоматериала возможен и на дому, если вызвать специалистов частной клиники.

Используют для теста кровь из пальца или вены, которую наносят на специальный картридж, куда капают специальный раствор. Получается цветная тест-карта, состоящая из полос, количество и расположение которых говорит о наличии иммуноглобулинов. Через 15 минут известны результаты. Точность достигает 65%. При возникающих сомнениях обязателен ПЦР-тест, поскольку ИФА может перепутать Ковид с другими родственными инфекциями. Кстати ПЦР тоже может быть экспресс-методом: всего полчаса и результат готов.