Когда сдавать анализ на антитела к коронавирусу

Характеристики и структура SARS-CoV-2

Вирион коронавируса SARS-CoV-2, как и большинство других Coronaviridae имеет шарообразную форму, с нуклеокапсидом и РНК внутри, а снаружи покрытым жировой (липидной) оболочкой. Длина РНК составляет до 30 000 нуклеотидов в последовательности, где также присутствуют нетранслируемые участки длиной 281 и 325 нуклеотида. Из липидной оболочки выступают булавовидные пепломеры гликопротеин S, гемагглютинин-эстераза (НЕ), белки М, Е.

Устойчивость во внешней среде

Согласно исследованиям2 итальянских ученых Filippo Ansaldi, P Morelli и прочих, капсид коронавируса (SARS-CoV), как и вируса группы А (Influenza A virus) повреждается при контакте с этанолом (70%), хлоргексидином (1%), гипохлоритом натрия (0,01%), что препятствует его дальнейшей репликации.

Другие дезинфекторы, которые убивают коронавирус в течение 1 минуты — этанол (80% и более), изопропанол (45%), н-пропанол (30%), мезетрония этилсульфат (0,2%).

Вирус разрушается на поверхности в случае воздействия на него температуры +33 °С в течение 16 часов, или +56 °С, в течение 10 минут.

Также инфекция разрушается при воздействии ультрафиолетовых лучей в течение 2-15 минут, это в случае обработки поверхности УФ-облучением от кварцевых ламп.

В воде коронавирусы способны сохранять свою активность в течение 9 суток. Столько же времени инфекция живет при комнатной температуре (около 22 °С) на следующих поверхностях — пластик, металл, стекло, бумага.

При охлаждении до +4 °С, особенно на фоне высокой влажности или замораживании температурой в −70 °С — в течение нескольких лет.

Как понять результаты ИФА

Чтобы расшифровать таблицу с результатами ИФА на коронавирус, нужно сравнить полученные результаты с референсными значениями. При качественном анализе в графе напротив обозначения иммуноглобулинов проставлен знак «+» или «-», при качественно-количественном указано количество антител.

Что значит комбинация антител

Важно! При показателях IgM (+) и IgG (-) на фоне отсутствия симптомов коронавируса рекомендуется безотлагательно сдать мазка из горла и носа на ПЦР.
Варианты результатов для количественных показателей

Комбинация IgM ≥ 1 и IgG ≥ 10 считается сомнительной, поскольку и тех и других иммуноглобулинов больше нормы. ИФА необходимо повторить через неделю.

Диагностика по совокупности результатов ПЦР и ИФА

В медицинском учреждении, где проводится исследование на антитела к коронавирусу, результаты выдают руки. В крупных клиниках, например, МЦ «Гемотест» предоставляется справка с уникальным QR-кодом.

Безопасно ли сейчас сдавать кровь?

Сдавать кровь не опаснее, чем ездить на работу или ходить в продуктовый магазин, если человек соблюдает меры предосторожности, уверяют медики. Кроме того, на станциях переливания делают все возможное, чтобы защитить доноров от коронавируса:. — интенсивнее проводят дезинфекцию помещений;
— на входе предлагают антисептик для обработки рук;
— сделали разметку для безопасной дистанции;
— медики работают в средствах защиты (маска, перчатки);
— измеряют температуру как потенциальным донорам, так и медицинским работникам

— интенсивнее проводят дезинфекцию помещений;
— на входе предлагают антисептик для обработки рук;
— сделали разметку для безопасной дистанции;
— медики работают в средствах защиты (маска, перчатки);
— измеряют температуру как потенциальным донорам, так и медицинским работникам.

После завершения процедуры кровь проверяют на вирусы и инфекции, которые могут передаваться от донора реципиенту (ВИЧ, гепатиты В и С). Нет никаких доказательств того, что какой-либо тип коронавируса передается при донации или переливании крови, отмечают в Центре им. Дмитрия Рогачева.

Классификация SARS-CoV-2

Активные исследования продолжаются, однако, на 27 января достоверно известны 26 генома SARS-CoV-2, а в марте их число увеличилось до 103.

В целом, уханьский коронавирус склонен к мутированию. Так, ученые выявили склонность SARS-CoV-2 к эволюционированию, поэтому, на март уже обнаружено 149 изменений в его штамме. Кроме того, новый коронавирус разделили на 2 подтипа — «L» и «S». Подтип «L» являлся первоначальной формой SARS-CoV-2, обнаруженной в Ухане, и его доля у больных составляет до 70%. Подтип «S» появился позже, является менее агрессивен и встречается примерно в 30% больных.

Штаммы коронавируса SARS-CoV-2

Наиболее популярными штамами являются:

«VUI-202012/01» — новый штамм коронавируса из Великобритании, или как его еще называют новый «Британский штамм», вызывающий COVID-19. Согласно последним данным, является на 70% более заразным, по сравнению с обычным, распространенным по всему миру штамом, терзающий людей с конца 2019 года

У «Британского коронавируса» выявлено 17 мутаций, но наиболее важной, которая и вызывает большую активность по проникновению в клетку «жертвы» является мутация N501Y в белке-шипе, использующийся для связывания в рецептором ACE2 человека. Именно из-за высокой заразности VUI-202012/01 на данный момент очень быстро вытесняет другие штаммы

Тем не менее, как заявляют вирусологи, против VUI-202012/01 вакцина будет также действенной.

Какие анализы показывают антитела

Сегодня действуют два варианта тестирования на иммуноглобулины к коронавирусу: лабораторный ИФА и экспресс-тест, который можно провести самостоятельно. ИФА является более точным методом оценки. Анализ может показать наличие антител и их количество.

Экспресс-тест отличается меньшей информативностью, поскольку дает только качественную оценку антител. Экспрессное тестирование на антитела к штамму коронавируса работает подобно стандартному тесту на беременность. На картридж нужно капнуть капельку крови и через 5-10 мин оценить результат.

Экспресс-тест-система (варианты результата)

Сегодня используется около 40 тест-систем, производимых в РФ, Китае, Голландии и Германии.

Как делают ИФА

ИФА крови (иммуноферментный анализ) – метод качественно-количественной диагностики, применяемый для выявления антител к коронавирусу. Исследование выполняется поэтапно:

• Исследовательский экземпляр вируса размещают на лабораторной поверхности и дополняют образцом крови пациента. Ig дифференцируют вирус по системе «свой – чужой». Признав антиген чужеродным, они берут его в кольцо. Это будет комплекс антиген-антитело.
• К сформированному комплексу присоединяют специальные ферменты, и с помощью колориметра оценивают цветовые изменения. Степень окраски показывает концентрацию вирусных частиц.

Результаты исследования оцениваются:

• по качеству – присутствие/отсутствие коронавируса;
• по количеству – концентрация (титры) иммуноглобулинов;
• по соотношению иммуноглобулинов – стадия КОВИД-19.

Иммуноферментный анализ выполняется с целью выявления бессимптомных носителей инфекции и людей, переболевших КОВИД-19. В первом случае рассматриваются показатели IgM, во втором – IgG.

Какой анализ назначают?

Чтобы выявить наличие или отсутствие вирусного микроорганизма вида covid-19, требуется применять метод ПЦР. Полимеразная цепная реакция обнаруживает даже малейшую концентрацию вируса в любых выделениях, которые взял для анализа врач. Для этого берут 2 вида биологического материала:

• кровь, в которой выявляют наличие иммуноглобулинов разных видов;
• мокрота из носоглотки, в ней активно развивается вирус при наличии острой фазы.

Если тест положительный, это указывает не только на наличие болезни, но и концентрацию определенного количества вируса в организме. Чем она больше, тем выше риск осложнений, дальнейшего прогрессирования болезни. Если пациент начал лечение, тест можно проходить повторно, выявляя концентрацию микроорганизма в период употребления назначенных лекарственных средств.

Бывают случаи, когда коронавирусная инфекция сопровождается осложнениями. Патогенные бактерии начинают активно размножаться, вызывая нагноение. То есть может образоваться ангина, гнойный бронхит или пневмония.

Реже развивается гнойный отит и гайморит. Тогда требуется проведение бактериологического посева. Берут небольшое количество выделений, засевая их на питательную среду. Определяют не только вид инфекции, но и антибиотики, которым у нее есть чувствительность. Одновременно проводят противовирусную и антибактериальную терапию.

Есть ли иммунитет к коронавирусу у переболевших?

Да, при нормальном функционировании иммунной системы, организм больного человека начинает вырабатывать защитные антитела (Ig G и Ig M). Иммуноглобулины этих двух классов являются основными показателями давности перенесённого заболевания.

После заражения коронавирусом клетки иммунной системы вырабатывают сначала Ig M – они вырабатываются быстро и сразу начинают защищать организм. Но эти антитела также быстро и заканчиваются. Однако на смену им приходят Ig G – они вырабатываются позже, но при этом сохраняют свою противовирусную активность дольше, хотя и постепенно снижаются со временем.

Однако так происходит не у всех.  В американском исследовании военнослужащих ВМС США у 41% переболевших обследованных вовсе не было обнаружено нейтрализующих антител в крови. В китайском исследовании, проведенном учеными из Университета Фудань в Шанхае, этот показатель составил 6%.

Это говорит о том, что до конца неясно, формирует ли каждый человек, переживший инфекцию COVID-19, защитный иммунитет.

Виды антител человека

У млекопитающих, то есть и у человека тоже, существует 5 классов антител, которые получили свое название по типу тяжелых цепей:

• IgA — антитела этого класса в основном обнаруживаются в секретах нашего организма. Их можно найти в слюне, слизи, вырабатываемой в носу, в грудном молоке, в пищеварительном соке. В плазме крови их относительно немного – всего 10-15% от общего объема всех Ig. Это – наша первая линия защиты слизистых оболочек. Сами по себе IgA не имеют бактерицидных свойств, то есть не уничтожают бактерии, но они нейтрализуют токсины, которые эти бактерии вырабатывают. Они также активируют защитную иммунную реакцию организма на вторжение вирусов. Именно IgA обеспечивают специфический иммунитет новорожденных, который те получают с молоком матери.
• IgE – об этих антителах знают все аллергики. Именно эти Ig играют ведущую роль в развитии аллергической реакции, которая является проявлением гиперчувствительности иммунной системы. У аллергиков показатели IgE могут быть в 10 раз выше, чем у обычного человека. А еще IgE отвечают за иммунную реакцию на глистов. Концентрация IgE также возрастает при некоторых аутоиммунных заболеваниях, таких как псориаз или ревматоидный артрит.
• IgM – вот это очень интересный класс антител, актуальный по нынешним временам. Когда патогенный организм проникает в тело, именно эти иммуноглобулины образуются в первую очередь. Это самые тяжелые Ig из всех. Они образуют пентамеры из пяти Y-образных белковых молекул. Их вариабельные области на торчащих наружу раздвоенных хвостах Y-белков сравнивают с набором деталей из конструктора, из которых можно выстроить любую конфигурацию. Именно такая уникальная конфигурация образуется при контакте IgM с поверхностными белками вируса или бактерии. Если в крови человека много IgM, например, к коронавирусу, это значит, что инфекция на ранней стадии — человек болен.
• IgD — иммуноглобулинов этого вида в плазме крови мало, порядка 0,25% от общего объема Ig. Ученые считают, что IgD работают вместе с IgМ, дополняя их функционально.
• IgG — самые важные для нас антитела в свете пандемии коронавируса. Антител этого класса в крови больше всего – 75%, и это главный тип иммуноглобулинов. Они связываются с патогенами, попавшими в тело, и тем самым приводят к их иммобилизации и агглютинации. Когда на поверхность вируса, бактерии, грибка усаживаются IgG, эти агрессоры попадают в поле зрения клеток иммунной системы фагоцитов, которые распознают вредителя и уничтожают его. IgG не только определяют врагов, они также запускают систему комплемента, что приводит к образованию белков, необходимых для уничтожения патогенных микроорганизмов. IgG также нейтрализуют токсины. Они также содержатся в материнском молоке и даже могут проникать сквозь плаценту, обеспечивая ребенку защиту как до родов, так и в первые месяцы жизни после них. Наличие IgG к определенной инфекции в плазме крови говорит о том, что организм уже не только познакомился с инфекционным агентом, но и уже научился с ним бороться.

Итак, при иммуноферментном анализе (ИФА) анализируется наличие антител IgM и IgG. Если в плазме крови есть только антитела IgM, это значит, что человек заболел недавно и болеет на данный момент. Если есть и IgM, и IgG, это значит, что борьба с инфекцией в разгаре и иммунная система уже вырабатывает необходимые для уничтожения вируса или бактерии антитела. Если же в плазме крови определяются только IgG, это значит, что инфекция была, но организм ее успешно победил, вылечился, но все еще помнит, как с ней бороться.

Для тех, кто задается вопросом о том, сколько же вариаций антител может существовать и не закончатся ли эти варианты на протяжении жизни одного человека, уточним, что ДНК, которая кодирует вариабельные участки антител, содержит 400 вариабельных генов, 12 генов разнообразия и 4 соединительных гена. В разных комбинациях они позволяют закодировать более 200 тысяч разновидностей вариабельных областей.

И это – не считая изменений нуклеотидов самих генов. По расчетам ученых, человеческий организм может произвести 100 млн разных антител, которые способны распознать практически любые существующие вещества, являющиеся для нас чужеродными. Этого за глаза хватит любому, даже очень активно контактирующему с инфекциями человеку.

Лечение коронавирусной инфекции COVID-19

Эффективным способом лечения пневмонии, вызванной коронавирусом в Китае, оказалась экстракорпоральная оксигенация, которую применили к пациентам китайские специалисты. Поскольку воспаленные легкие не в состоянии обеспечить организм нужным количеством кислорода, последний вводится извне, минуя легкие, что дает возможность поддержать работу жизненно важных органов.

Помочь облегчить (но не повысить эффективность борьбы организма с вирусом!) общее состояние пациентов могут лекарства для снижения температуры — жаропонижающие (парацетамол, ибупрофен). Назначается дезинтоксикационная инфузионная терапия, применяются витамины. Глюкокортикостероиды не только не эффективны, но и усугубляют состояние больных из-за подавления иммунитета, поэтому их не применяют.

В первые дни болезни иммунитет не реагирует на вирус, не образует в нужном количестве защитные антитела и клетки, способные обезвредить возбудителя. Позднее антитела появятся и будут еще долгое время циркулировать в кровотоке. Этот факт лег в основу новейшего метода лечения коронавируса — переливание плазмы с антивирусными белками выздоровевших пациентов вновь заболевшим.

Какими и когда все же коронавирус лечат антибиотиками

Антибиотиками лечат при коронавирусе пневмонию, показаниями к применению могут быть:

• обширное поражение легких;
• наличие обильной мокроты в дыхательных путях, особенно желтой (гнойной);
• хронические воспалительные заболевания бронхов, легких – бронхит, хроническая обструктивная и бронхоэктатическая болезнь;
• применение гормональной и противоопухолевой терапии перед поступлением в стационар.

В рекомендациях Минздрава указано, что при поступлении больного в крайне тяжелом состоянии антибиотики начинают вводить даже до получения результатов анализов. Такая терапия называется упреждающей, она может включать один из препаратов:

• Аугментин,
• Мофлаксия,
• Зинфоро,
• Цефотаксим,
• Цефтриаксон.

В дальнейшем ориентируются на анализы, поэтому к первому препарату могут добавить Оксациллин, Ванкомицин, а также может быть и полная замена. Наиболее универсальными считают Линезолид и Зинфоро. Антибиотики при осложнении коронавируса пневмонией в обязательном порядке сочетают с основным лечением – противовирусной терапией. Если больной был подключен к аппарату искусственного дыхания, то могут понадобиться еще и противогрибковые средства.

В каких случаях врачи обязаны брать тесты на коронавирус

Есть определенные факторы, считающиеся прямым показанием для прохождения теста на коронавирусную инфекцию. Врачи обязаны брать тест в таких случаях:

1. Человек приехал из другого государства, при этом каких-либо симптомов у него нет.
2. За последние две недели были подтвержденные контакты с людьми, которые находятся под наблюдением по COVID-19 и заболели – их список определяет Роспотребнадзор.
3. У человека за последние 14 суток были контакты с лицами, у которых коронавирус подтвержден лабораторным исследованием.
4. У лиц, которые обратились за медпомощью с признаками респираторного заболевания и их возраст свыше 65 лет.
5. Человеку поставлен диагноз «внебольничная пневмония».
6. У госпитализированного лица присутствует ОРВИ тяжелой либо средней формы.

В Минздраве отдельно отмечают, что наличие или отсутствие показаний для проведения теста на коронавирус первоочередно определяет лечащий врач. Сдать анализ по своему желанию бесплатно и без наличия веских оснований человек не может. Это обусловлено тем, что по правилам считывать симптоматику и показания вправе исключительно медицинский работник.

Выводы

Ответы антител на SARS-CoV-2 у детей и взрослых отличаются. У детей вырабатываются S-антитела IgG с самым низким общим уровнем нейтрализующей активности по сравнению со взрослыми.

У детей с разной степенью тяжести заболевания (с ДМВС или без него) наблюдались сходные профили антител, в то время как у взрослых с наиболее тяжелым заболеванием (ОРДС) были более высокое содержание, ассортимент и нейтрализующая активность антител, чем у взрослых с заболеванием легкой формы.

Сходные профили антител у детей с ДМВС и без него позволяют предположить, что адаптивный иммунный ответ сам по себе не связан с патогенезом ДМВС. Однако снижение нейтрализующей активности антител может предрасполагать детей к развитию устойчивой инфекции низкого уровня в других местах, что приводит к развитию ДМВС. У детей могут быть желудочно-кишечные симптомы, а не респираторные. У детей наблюдается длительное выделение вируса с фекалиями.

Присутствие ненейтрализующих S-антител может привести к антителозависимому усилению инфекции, как это происходит при вирусных инфекциях, включая SARS-CoV-1. Кроме того, аутореактивные антитела, недавно выявленные у детей с ДМВС, могут способствовать ненормальным иммунным ответам, ведущим к системному воспалению.

Хотя наблюдалась связь с повышенным количеством S-антител IgG со временем после появления симптомов, основным фактором, определяющим профили антител, оставался возраст. Кроме того, у детей с ДМВС ответ антител через 2-4 недели не менялся. Это означает, что содержание антител стабильно в течение нескольких недель.

Более легкое течение COVID-19 у детей согласуется с более низким содержанием N-антител, так как высвобождение N-белков требует разрушения инфицированных вирусом клеток. То, что у взрослых больше N-антител, согласуется с риском более тяжелого и длительного заболевания. Так как у детей содержание N-антител ниже, чем у взрослых, наиболее распространенный анализ на N-антитела IgG может быть неэффективным для детей.

Течение COVID-19 и иммунные ответы на коронавирус отличаются у взрослых и детей, независимо от того, развиваются ли у детей мультисистемный воспалительный синдром

Это важно для разработки ориентированных на возраст стратегий тестирования и защиты населения

Предыдущее воздействие SARS-CoV-2 не может гарантировать полного иммунитета во всех случаях. Все люди, независимо от того, был ли ранее диагностирован COVID-19 или нет, должны принимать меры предосторожности, чтобы избежать заражения SARS-CoV-2. Случаи повторного заражения говорят о том, что для обеспечения коллективного иммунитета нельзя полагаться на иммунитет, приобретенный в результате естественной инфекции. Эта стратегия не только смертельна для многих, но и неэффективна. Коллективный иммунитет требует безопасных и эффективных вакцин и надежного внедрения вакцинации

Случаи повторного заражения говорят о том, что для обеспечения коллективного иммунитета нельзя полагаться на иммунитет, приобретенный в результате естественной инфекции. Эта стратегия не только смертельна для многих, но и неэффективна. Коллективный иммунитет требует безопасных и эффективных вакцин и надежного внедрения вакцинации.